INTRODUCTION
Membrane Echangeuse d’ions : Chromatographie sur membrane
La purification de protéines en milieu complexe est une étape clé du process, aussi bien en recherche qu’en production, dans les industries Biopharmaceutiques. Néanmoins, la chromatographie « classique » sur bille reste une technique lente qui ralentit considérablement les étapes de downstream.
Chromatographie à grande vitesse
La technologie de chromatographie sur membrane, permet de gagner du temps sur de nombreuses applications. Avec des débits 20 à 40 fois supérieurs que sur une colonne, la simplicité d’utilisation et la rapidité font de Sartobind® un support de choix pour purifier, avec un haut rendement, de nombreuses protéines.
A échelle laboratoire, le format sous colonne à centrifuger de Vivapure®, comportant la même membrane de chromatographie que Sartobind®, permet d’effectuer des séparations rapides et faciles.
Une technologie unique pour l’élimination ou la purification de virus et grosses molécules
L’observation microscopique (Fig.1) de billes de gel ( diamètre environ 90 mm), disposées sur la surface d’une membrane Sartobind®, nous permet de constater la différence majeure existant entre ces deux supports : la taille des pores.
Fig.1 : Structure d’une membrane SartobindÒcomparée à des billes de gel
Les pores d’une bille de gel ont un diamètre entre 15 et 40 nm, ceux d’une membrane sont supérieurs à 3000 nm. De plus, 95 % des sites de fixation dans une bille sont à l’intérieur de sa structure poreuse, et donc difficiles d’accès pour de grosses molécules. Sur une matrice membranaire, la structure macroporeuse met à disposition des molécules des sites répartis de façon homogène, proches de la surface de la membrane cellulosique, et plus faciles d’accès pour de grosses molécules.
Cette particularité de structure des membranes de chromatographie en fait un support de choix pour la séparation de grosses molécules tels que les virus.
De plus, du fait de la taille importante des pores sur une membrane, le transport diffusif des molécules vers leur site de fixation est remplacé majoritairement par un phénomène de convection, plus rapide. Ceci explique la rapidité des cycles de travail sur Sartobind® et les débits particulièrement élevés que l’on peut atteindre.